酶聯(lián)免疫試劑盒的洗滌主要有哪兩大方法？

 

　　酶聯(lián)免疫試劑盒是動物腦垂體分泌作用于卵巢卵泡生長、發(fā)育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素.由于是生物大分子,不能透過細胞膜,FSH必須與靶細胞膜上的促卵泡素受體（FSHR）結(jié)合,經(jīng)過受體介導將信息傳遞到靶細胞內(nèi),才能發(fā)揮其生物學功能.所提供的ELISA Kit是典型的酶聯(lián)免疫試劑盒。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

 

　　酶聯(lián)免疫試劑盒靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。對于酶聯(lián)免疫試劑盒的洗滌主要有兩大方法，那今就給大家簡單講解下哦。

 

　　一、是流水沖洗式

 

　　開始用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*，且也簡便、快速。已有實驗表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。

 

　　二、浸泡式

 

　　1.吸干或甩干孔內(nèi)反應液;

 

　　2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去);

 

　　3.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短;

 

　　4.吸干孔內(nèi)液體，吸干應*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;

 

　　5.重復操作c和d，洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。