DNA提取：對(duì)上述處理好的標(biāo)本加入等體積核酸提取液（固體標(biāo)本加入50μL核酸提取液），100℃恒溫處理10min，13,000rpm離心5min，取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5mL EP管，-20℃保存。檢測(cè)方法的局限性：
a.樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；
b.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
c.陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果；
d.病原體在流行過程中基因突變、重組，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
e.不同的提取方法存在提取效率差異，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；
f.試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果；
g.本檢測(cè)結(jié)果僅供參考，如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。
結(jié)果判斷：
陽(yáng)性：檢測(cè)通道Ct值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線。
可疑：檢測(cè)通道Ct值>35.0，且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn)，重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)Ct值≤35.0和典型擴(kuò)增曲線者為陽(yáng)性，否則為陰性。
陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果無Ct值且無明顯的擴(kuò)增曲線。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)：
陰性質(zhì)控品：無明顯擴(kuò)增曲線或無Ct值顯示；
陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期，且Ct值≤32；以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無效。
